Tlhōrō e hlakileng, e bohale e bohlokoa bakeng sa liphetho tse nepahetseng tlhahlobong ea High-Performance Liquid Chromatography (HPLC). Leha ho le joalo, ho fumana sebopeho se phethahetseng sa tlhoro e ka ba phephetso, ’me lintlha tse ngata li ka tlatsetsa liphellong tse mpe. Sebopeho se fosahetseng sa tlhoro ho HPLC se ka bakoa ke litaba tse fapaneng tse joalo ka tšilafalo ea kholomo, ho fapana ha solvent, molumo o shoeleng, le ho tšoara sampole e sa lokelang. Ho utloisisa lisosa tsena tse tloaelehileng le mokhoa oa ho li rarolla ho bohlokoa bakeng sa ho boloka liphetho tse nepahetseng le tse tšepahalang tsa chromatographic.
Kameho ea Tšilafalo ea Kholomo ho Sebopeho sa Peak
E 'ngoe ea lisosa tsa mantlha tsa sebopeho se tlase sa tlhoro ho HPLC ke tšilafalo ea likholomo. Ha nako e ntse e ea, litšila tse tsoang sampuling kapa li-solvents li ka bokella kholomong, tse lebisang karohanong e futsanehileng le litlhōrō tse sothehileng. Tšilafalo ena e ka etsa hore ho be le litlhoro tse holimo kapa tse ka pele, tseo ka bobeli li ka amang boleng ba tlhahlobo ea hau haholo.
Ho qoba tšilafalo ea likholomo, ho hloekisa kamehla le ho boloka litšiea tse nepahetseng ke tsa bohlokoa. Latela likhothaletso tsa bahlahisi bakeng sa ho hloekisa liprothokholo, 'me u sebelise lihlapolli tse hloekileng haholo le litokiso tsa sampole ho fokotsa tšilafalo. Haeba tšilafalo e ntse e tsoela pele, ho ka 'na ha hlokahala hore ho khutlise kholomo.
Solvent Mismatching le Phello ea eona ho Boleng ba Peak
Sesosa se seng se tloaelehileng sa sebopeho se futsanehileng sa tlhoro ke ho se lumellane lipakeng tsa sampole ea solvent le mobile phase solvent. Haeba lihlapolli li sa tsamaisane, sena se ka lebisa ho ente e fokolang ea sampole le karohano e mpe, e leng se bakang litlhoro tse pharaletseng kapa tse khopameng.
Ho rarolla bothata bona, ka linako tsohle etsa bonnete ba hore sampole ea solvent ea hau e lumellana le mobile phase. Sena se ka finyelloa ka ho sebelisa li-solvents tse nang le polarities tse tšoanang kapa ka ho hlapolla sampole hantle. Hape ke mokhoa o motle oa ho sebelisa lihlapolli tse ncha ho thibela ho thehoa ha metsi leha e le afe a ka 'nang a kena-kenana le tlhahlobo.
Mathata a Molumo o Shoeleng le Litharollo Tsa Bona
Molumo o shoeleng o bolela libaka tse ka har'a sistimi, joalo ka ente kapa tubing, moo sampole kapa karolo ea mohala e thellang. Sena se ka baka mathata a kang ho atolosoa ha tlhōrō kapa libopeho tse sothehileng, kaha sampole ha e tsamaee hantle tsamaisong. Hangata molumo o shoeleng o bakoa ke ho seta tsamaiso e fosahetseng kapa ho sebelisa likaroloana tse sa etsetsoang lits'ebetso tsa HPLC.
Ho rarolla mathata a molumo o shoeleng, hlahloba sistimi ea hau khafetsa bakeng sa libaka life kapa life moo sampole e ka emang teng. Etsa bonnete ba hore likhokahano tsa hau li tiile, li-tubing li boholo bo nepahetseng, 'me ha ho na li-kinks kapa tse lutlang. Ho fokotsa molumo o shoeleng ho ka ntlafatsa haholo sebopeho sa tlhoro le tharollo.
Karolo ea Mehlala ea ho Tšoara le Lisebelisoa tsa Ente
Mokhoa o nepahetseng oa ho sebetsana le mehlala o bohlokoa bakeng sa ho fumana liphetho tse nepahetseng le tse ka hlahisoang hape. E 'ngoe ea lisosa tse hlokomolohuoang haholo tse bakang sebopeho se tlase sa tlhoro ke tšebeliso e fosahetseng ea lisebelisoa tsa ente, joalo ka lisyringe, linale le linkho tsa sampole. Sirinji e litšila kapa e senyehileng e ka hlahisa litšila kapa ea baka liente tse sa tsitsang, tse lebisang ho sebopeho se fosahetseng sa tlhoro.
Netefatsa hore ka linako tsohle u sebelisa lisyringe le linale tse hloekileng, tsa boleng bo holimo, 'me u qobe ho tlatsa vial ea sampole. Ho feta moo, ho sebelisa mofuta o nepahetseng oa vial ho ka thusa ho thibela tšoaetso le ho boloka botsitso bo phahameng. Kamehla hlahloba 'me u nke sebaka sa lisebelisoa tse tsofetseng kapa tse senyehileng ho netefatsa ts'ebetso e nepahetseng.
Mokhoa oa ho boloka Sisteme ea hau ea HPLC bakeng sa Sebopeho se Hloahloa sa Peak
Ho thibela sebopeho se futsanehileng sa tlhoro ho HPLC ho qala ka tlhokomelo e nepahetseng ea sistimi. Ho hloekisa khafetsa, khetho e hlokolosi ea solvent, le ho tšoara sampole e nepahetseng ke senotlolo sa ho netefatsa ts'ebetso e ntle ea chromatographic. Latela mehato ena ho boloka sistimi ea hau:
Kamehla hloekisa 'me u nkele kholomo ea hau sebaka ho latela litataiso tsa moetsi.
Sebelisa feela li-solvents tse hloekileng haholo 'me u lokise lisampole tsa hau ka hloko ho qoba tšoaetso.
Fokotsa molumo o shoeleng ka ho hlahloba le ho boloka likarolo tsa sistimi ea HPLC ea hau.
Etsa bonnete ba ho tšoara sampole e nepahetseng ka lisebelisoa tsa ente tsa boleng bo holimo le tse hloekileng.
Qetello: Finyella Litlhōrō tse sa fetoheng, tse Motsu ka Tlhokomelo e Nepahetseng
Sebopeho se fokolang sa tlhōrō ho HPLC e ka ba taba e ferekanyang, empa ka ho utloisisa lisosa tse tloaelehileng le ho latela mehato e seng mekae e bonolo ea tlhokomelo, u ka ntlafatsa liphello tsa hau haholo. Litlhahlobo tsa khafetsa tsa sistimi, tokiso e nepahetseng ea sampole, le ho sebelisa likarolo tsa boleng bo holimo li bohlokoa bakeng sa ho boloka sebopeho se holimo le ts'ebetso ea chromatographic.
Ho netefatsa bophelo bo bolelele le ho nepahala ha sistimi ea hau ea HPLC, ho bohlokoa hore u lule u falimehile u bile u le mafolofolo tlhokomelong ea sistimi. Haeba u tobane le mathata ka sebopeho se phahameng kapa u hloka thuso ho ntlafatsa sistimi ea hau ea HPLC, ikopanyeChromasirkajeno bakeng sa likeletso tsa litsebi le litharollo tse tsamaellanang le litlhoko tsa hau.
Nako ea poso: Apr-28-2025